先驱威锋技术开发-乳制品内---酶测量

β-内---酶测量分析仪生物法

[原理]以一-种对青霉高度敏感的----枯草芽孢菌作为指示剂，试验时如果被测细菌株产生青霉酶，破坏了青霉，则此高度敏感菌株即可生长，否则，指示剂则被抑制。

[方法] 以枯草芽孢菌为指示菌，用棉拭子将枯草芽孢菌接种于琼脂培养基_上，或倾注方法将枯草芽孢菌混于琼脂平板内。然后将被测菌与产青霉酶阳性及阴性对照菌株，按下图接种划线，在琼脂培养基中央放置一-含青霉g (1单位)纸片。放置35°c培养24小时后观察结果。

[结 果判断]如被检菌产生青霉酶，则沿着被测菌处的枯草芽孢菌---环出现凹痕。

β-内---酶测量分析仪碘量法

[原理]β-内---酶能裂解青霉的β-内---环形成青霉唑酸，它与淀粉竞争游离碘，破坏了碘和淀粉的兰色复合物，使兰色变为无色。

[方法] 将0.25克.青霉溶于41.7mlph6.0 的磷酸盐缓冲液中，乳制品内---酶测量，使其浓度成6000ug/ml。 取0.1ml

于一小试管中。

将培养18-24小时的---在含青霉试管内制成浓厚菌悬液(109/ml)。

在37c水浴中放置30分钟，不时摇动，使酶能破坏青霉。

加入1%可溶性淀粉溶液0.5ml，摇匀。

加入碘液 0.02 ml。

在 37°c水浴中放置10分钟，观察结果。

[结果]在10分钟内能使兰色完全消退的菌株为β-内---酶阳性，乳品内---酶测量，不消退者为阴性。

[注意事项] 

由于青霉很容易分解，因而用于实验的青霉应新鲜配制。

淀粉也新鲜配制，内---酶测量，在100ml蒸馏水中加入1克可溶性淀粉，放到开水中水浴直到淀粉溶解。

实验应 按照步骤操作，如果碘加得过早，酶反应就会停止，产生假阴性结果。

每次试验用阳性和阴性对照。